蛋白酶和淀粉酶活性检测方法探讨
www.xbxmw.com 2007-6-24 19:38:07 来源： 阅读：次
2.2.2 碘贮存液(0.1mol/L)
称取1.7835g碘酸钾和22.5g碘化钾，溶于去离子水中，再缓慢加人4.5mL浓盐酸，用去离子水稀释至500mL，充分混匀，贮棕色瓶中，每月配制新鲜溶液，置冰箱中保存。
2.2.3 碘稀释液(0.lmol/L) 取碘贮备液用去离子水稀释10倍，贮棕色瓶中，现用现配。
2.3 操作步骤
称取酶粉1.0g充分碾细，加去离子水100mL,在40℃水中搅拌30min，充分溶出酶蛋白，过滤，滤液备用。按表2分别加入底物缓冲液、酶滤液、碘稀释液和去离子水，混匀，于660nm波长处(lcm光径)，以去离子水调吸光度为零，读各管吸光度。
表2 试剂用量
加入物 测定管（Ｕ）（３支平行样）空白管（Ｂ）
底物缓冲液(40℃预温５min,mL) 1.0 1.0
酶滤液（mL）混匀，40℃水浴7.5min 0.2 -
碘稀释液（mL） 1.0 1.0
去离子水（mL） 6.0 6.2
2.4 淀粉酶活力计算
淀粉酶活力= 式中:AB:空白管吸光度；AU:测试管吸光度；淀粉酶活性定义:lmL酶滤液中(1g酶粉)的酶，在40℃和底物淀粉作用30min，水解10mg淀粉为1个淀粉酶活性单位。
3 讨论
目前市场上出售的酶制剂种类很多，由于酶的定义和测定方法至今没有统一，不同的生产厂家采用标准和定义往往各不相同，产品质量说明也就缺少科学依据。本文简介了蛋白酶和淀粉酶活性定义和测定方法，供同行共同探讨，以便找出更加科学、合理、统一的简便易行的酶活测定方法，促进酶制剂在饲料工业中的发展。
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